PCR實驗室設計規(guī)范應包含以下幾個部分:
PCR實驗室平面布局:PCR擴增檢驗實驗室原則上分為四個單獨的工作區(qū)域:試劑貯存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增反應混合物配制和擴增區(qū)、擴增產物分析區(qū)。為避免交叉污染,進入各個工作區(qū)域必須嚴格遵循單一方向進行,即只能從試劑貯存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增反應混合物配制和擴增區(qū)→擴增產物分析區(qū)。各實驗區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應通過傳遞窗進行。
三區(qū)分隔和氣壓調節(jié):將 PCR 過程分成試劑準備、標本制備和 PCR 擴增檢測三個獨立的實驗區(qū),整個區(qū)域有一個整體緩沖走廊。每個獨立實驗區(qū)設置有緩沖區(qū),通過氣壓調節(jié),使整個 PCR 實驗過程中,試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產物對人員和環(huán)境的污染。
PCR實驗室可以是分散形式,也可以是組合形式。完成一組PCR實驗,通常應經過試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產物分析四個實驗過程,若實驗工藝需要,還應增加樣品粉碎過程。